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qpcr原理及应用(qpcr原理及应用ppt)

qpcr原理：通过凝胶电泳、毛细管电泳等方法对产物进行检测。qpcr应用于大学及研究所、CDC、检验检疫局、兽医站、食品企业及乳品厂等。qpcr是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应循环后产物总量的方法。

qpcr原理及应用如下：qpcr原理：qPCR，即荧光定量PCR，其原理主要包括定量分析的数学原理和产生荧光的化学原理。在DNA扩增反应中，qPCR通过荧光化学物质测量每次聚合酶链式反应（PCR）循环后的产物总量。

qpcr原理及应用如下：原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。

qPCR原理是将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性，低温复性，适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光。

原理 在指数阶段，PCR 产物的量在每个循环中大约增加一倍。然而，随着反应的进行，反应组分被消耗，最终一种或多种组分变得有限。此时，反应减慢并进入平台期。

DNA纯化的方法?

氯仿/异戊醇纯化，乙醇沉淀法 2 玻璃奶纯化法 3 硅胶柱纯化法。

纯化DNA的第一步是 破碎细胞 。最简单的方法是在样本中加入像十二烷基硫酸钠（SDS）之类的去垢剂。破碎后通过两种方法能获得纯净的DNA。

硅磁（Magnetic Silica Particle）就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料，来吸附核酸，其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料（如DEAE，COOH）等，从而达到吸附核酸目的。

首先提取的dna样品不纯抑制后续pcr反应要重新纯化dna，去除蛋白、多糖、多酚等杂质重新沉淀dna。其次重新沉淀dna，让酒精充分挥发。最后增加70％乙醇洗涤的次数2到3次。

透析袋电泳法：与常规琼脂糖电泳原理相同，将含有目的基因片段的凝胶切下来，装入透析袋中，同时装入电泳缓冲液，再按常规电泳方法电泳，让DNA在透析袋内走出凝胶块，再纯化缓冲液中的DNA片段。

高中生物课件大全(5篇)

高三一轮生物教案5篇 生物最重要和基本的特征在于生物进行新陈代谢（又称分泌物）及遗传。生物具备合成代谢以及分解代谢，这是互相相反的两个过程，并且可以繁殖下去， 这是生命现象的基础。

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“水分代谢”是高中生物第二章的重点内容，它与前面所学知识如细胞成分、结构及植物根、茎、叶结构等内容联系非常紧密；也为今后学习“矿质代谢”、“光合作用”、“呼吸作用”等内容奠定基础。

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